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腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移主要包括以下5個過程：
原位侵襲（Local invasion），
腫瘤細(xì)胞內(nèi)滲（Intravasation），
循環(huán)系統(tǒng)存活（Survival in the circulation），
腫瘤細(xì)胞外滲（Extravasation），
形成轉(zhuǎn)移灶（Micrometastasis formation）等。
其中細(xì)胞侵襲發(fā)生在第一步，即腫瘤細(xì)胞在原位突破基底膜，然后內(nèi)滲進(jìn)入血管、淋巴管的過程。其侵襲性是腫瘤相關(guān)信號通路、藥物治療、靶向治療、致癌/抑癌基因等腫瘤學(xué)研究的一個重要指標(biāo)。
（腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移過程，來源DOI:10.1016/j.cell.2011.09.024）
腫瘤細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)通常利用細(xì)胞小室（常用6孔、12孔、24孔板等）進(jìn)行檢測。
與腫瘤細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)不同的是，需在聚碳酸酯膜上側(cè)鋪一層基質(zhì)膠，用以模仿細(xì)胞外基質(zhì)。
腫瘤細(xì)胞必須分泌基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）消化基質(zhì)才能進(jìn)入下室，更好的模擬了動物體內(nèi)的情況。
侵襲實(shí)驗(yàn)過程
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a. 基質(zhì)膠包被：
(a) 將基質(zhì)膠置于冰中并在4℃融化，使用預(yù)冷的移液管或吸頭混合基質(zhì)膠至均勻狀態(tài)。(b) 在冰上，將基質(zhì)膠用無血清培養(yǎng)液按照1:8的比例進(jìn)行稀釋，例如取8μl基質(zhì)膠加入64μl不含血清的培養(yǎng)液中，使用預(yù)冷的吸頭混合至均勻狀態(tài)。
注：常用的稀釋比例為1:4、1:6、1:8，可根據(jù)實(shí)驗(yàn)具體情況調(diào)整稀釋比例。(c) 取60μL上述混合溶液垂直加入細(xì)胞小室中，使其均勻平鋪在底部。
(d) 吸出未結(jié)合的基質(zhì)膠。
(e) 加入100μl不含血清的培養(yǎng)液，將培養(yǎng)板置于37℃培養(yǎng)箱孵育30分鐘，進(jìn)行水化。(f) 去除小室中液體，檢查是否有液體穿過小室進(jìn)入到下室中，若沒有，則可用于接種細(xì)胞。
b. 細(xì)胞懸液的制備：(a) 對細(xì)胞進(jìn)行12-24小時的饑餓處理。（非必需步驟）(b) 消化細(xì)胞，用不含血清的培養(yǎng)液重懸，調(diào)整細(xì)胞密度為5-50萬個/mL。
c. 細(xì)胞接種：(a) 取500μL含10% FBS的培養(yǎng)液加入24孔板下室，用鑷子將細(xì)胞小室置于24孔板內(nèi)。
(b) 取200μL細(xì)胞懸液加入細(xì)胞小室。(c) 將24孔板置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24-48小時。
d. 細(xì)胞固定、染色：(a) 取出細(xì)胞小室，去除培養(yǎng)液，用棉簽輕輕擦拭基質(zhì)膠及細(xì)胞。(b) 在24孔板干凈的孔中加入600μl 4%多聚甲醛固定液，將小室放入固定20-30分鐘。(c) 棄固定液，PBS洗滌小室1次。
(d) 在24孔板干凈的孔中加入適量結(jié)晶紫染色液，將小室放入染色5-10分鐘。(e) 取出小室，PBS洗滌3次。
(f) 適當(dāng)風(fēng)干后，顯微鏡下觀察并計數(shù)。
除細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)外，基質(zhì)膠可被用于類器官培養(yǎng)、干細(xì)胞分化、血管生成、體內(nèi)腫瘤發(fā)生等多項研究。
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